🧬 技术服务 · 果蝇转基因 · 子类
PiggyBac 转座酶随机插入
利用 PiggyBac / Minos 等转座酶将目的基因随机整合进果蝇基因组，成熟稳定的经典转基因方案。
🔬 技术详情
原理 · 流程 · 优势 · 适用
PiggyBac 转座酶随机插入
技术原理
利用 PiggyBac 或 Minos 等转座酶，将含有目的基因的转座子载体随机整合进果蝇基因组，借助特定标记（如 w+ 红眼、vermillion、mini-white）筛选阳性个体，再通过平衡染色体建立稳定品系。
工作流程
载体构建
→
胚胎注射
→
F0 筛选
→
平衡建系
核心优势
- 技术成熟，操作稳定
- F0 代阳性率较高
- 成本较为经济
- 可同时插入多个基因
典型适用
🧬 技术原理示意图
PiggyBac 转座酶介导的随机插入
转座酶识别转座子两端的 5' / 3' 反向重复序列，将目的基因随机整合进基因组
Transposition PiggyBac
5' / 3' transposon（转座子臂）
insertion（目的基因）
mini-White（筛选 marker）
backbone（质粒骨架）
📋 详细实验流程
PiggyBac 随机插入标准流程
从注射样品制备到稳定品系构建，6 阶段共需 11-18 周
PiggyBac 随机插入
| 实验步骤 | 内容 | 周期(周) |
|---|---|---|
| 注射样品制备 |
|
1~4 |
| 显微注射 |
|
2 |
| 杂交和筛选 |
|
2 |
| 分子鉴定 |
|
0 |
| 构建稳定品系 |
|
6~10 |
| 合计 | — | 11~18 |